笨神速刷检验笔记(1093)
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### 抗凝剂考点 | 盖子颜色 | 添加抗凝剂 | 注意事项 | 用途 | |------|---------------|-------------------------------|--------------------| | 红色 | 无 | 凝块形成约30-60min | 化学、血清学、血库 | | 紫色 | EDTA | 须颠倒混匀8次 | 全血细胞计数（CBC） | | 淡蓝色 | 枸橼酸钠 | 须颠倒混匀3-4次；血液与抗凝比例为9:1 | 凝血检查（PT、APTT、因子测定） | | 绿色 | 肝素钠、肝素锂、肝素铵 | 根据实验需要，选择不同型的肝素；须颠倒混匀8次 | 化学 | | 灰色 | 氟化钠 | 须颠倒混匀8次 | 葡萄糖、糖耐 | | 黄色 | 多聚茴香脑磺酸钠（SPS） | 须颠倒混匀8次 | 血培养 | | 金黄色 | 分离胶/凝块激活剂 | 须颠倒混匀5次，使血液与激活剂充分接触。凝块完全形成后离心 | 化学 | | 淡绿色 | 分离胶/肝素锂 | 须颠倒混匀8次 | 钾测定 | | 黑色 | 枸橼酸钠 | 血液与抗凝剂比例为4:1 | 血沉 |
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### 溶血引起部分物质血清浓度的变化 |相关成分|红细胞内浓度与血清比率|1%溶血后血清浓度变化| |-----|-----|-----| |LDH|160:1|+272| |AST|40:1|+220| |K离子|23:1|+24.4| |ALT|6.7|+55| |GLU|0.82:1|-5| |磷酸盐|0.78:1|+9.1| |NA离子|0.11|-1| |CA离子|0.10:1|+2.9|
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### 瑞氏染色与吉姆萨染色区别 |比较|瑞氏染色|吉姆萨染色| |----|----|----| |染液组成|酸性伊红、碱性亚甲蓝|天青、伊红| |染色原理|即有物理吸附，又有化学亲和|同瑞氏染色| |区别与联系|瑞氏染色最常用，最经典，对细胞质成分和中性颗粒染色效果好，但对细胞核和寄生虫着色能力较差。|对细胞核和寄生虫染色效果好| |PH影响|偏酸与伊红结合，染色偏红；偏碱与亚甲蓝结合，染色偏蓝；|---| |注意事项| (1)血涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。(2)冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久，以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。(3)染色过可以复染。复染时应先加缓冲液，然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。(4)瑞氏染色I液由瑞氏染料、甲醇(AR级以上)和甘油组成，Ⅱ液为磷酸盐缓冲液(pH6.4~6.8)。|---|
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### 血涂片制备 |A|B| |----|---| |血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快,血膜愈厚|血滴愈小、角度愈小、推片速度愈慢,血膜愈薄。| |血细胞比容增高、血液黏度较高时：应采用小血滴、小角度、慢推|血细胞比容减低、血液较稀时：应采用大血滴、大角度、快推|
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### 血红蛋白结构速记 |血红蛋白|亚基|备注| |----|----|----| |HbGowerI|ζ2ε2|第一个有功能的胚胎期血红蛋白| |HbGowerII|a2ε2|胚胎期血红蛋白| |HbPortland|ζ2γ2|胚胎期血红蛋白| |HbF|a2γ2|胚胎期血红蛋白；具有抗碱和抗酸作用| |HbA|a2β2|正常成人占95%以上| |HbA2|a2δ2|出生后占HB总量2%-3%| |HBS|血红蛋白S|镰型红细胞| |HBH|β4|| |Hbbarts|γ4||
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### 血红蛋白分子结构和特点考点总结 |考点|| |----|----| |血红蛋白结构|由两对珠蛋白肽链和4个亚铁血红素构成。珠蛋白：4条肽链（α、β链），亚铁血红素：原卟啉、铁 |血红蛋白分子量|血红蛋白相对分子质量为64458| |还原血红蛋白|正常情况下，99%血红蛋白为还原血红蛋白(Fe2+)| |高铁血红蛋白|正常情况下，1%为高铁血红蛋白(Fe3+)| |氧合血红蛋白|只有Fe2+状态的血红蛋白才能与氧结合，称为氧合血红蛋白| |调节|血红蛋白合成受红细胞生成素EPO、雄激素调节| |降解|血红蛋白降解产物为珠蛋白、血红素|
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### 改良牛鲍计数板的结构 血细胞计数板(改良牛鲍计数板)用优质厚玻璃制成。每块计数板由“H”形凹槽分为2 个同样的计数池。计数池两侧各有一条支持柱，将特制的专用盖玻片覆盖其上，形成**高0.10mm**的计数池。 计数池内划有长、宽各3.0mm的方格，分为**9 个大格**。 **每个大格面积为1.0mm^2,容积为0.1mm^3(ul)。** **每个大格面积为容积为0.1ul(0.1X10^-6L)。** 其中： **红细胞和血小板计数区域**：中央大方格用双线分成25 个中方格，位于正中及四角的5 个中方格是红细胞和血小板计数区域，每个中方格用单线分为16个小方格。 **白细胞计数区域**：四角的4 个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16 个中方格。 根据1941年国际标准局(NBS) 规定，大方格每边长度允许误差为土1%，即1土0.01mm,盖玻片与计数池间隙深度允许误差为土2%，即0.1士0.002mm。  **WBC计数区域**：四角的4 个大方格（蓝色区域） **红细胞RBC和血小板PLT计数区域**：正中及四角的5个中方格（红色区域,总面积占一个大方格面积的1/5） **压线细胞**：数左不数右，数上不数下
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### 白细胞，红细胞，血小板计数公式 #### WBC计数公式： 假如N为4个大方格内白细胞总数。 计算公式： WBC=((N／4)／0.1ul) X 20（稀释倍数） =(N/4)X10^7X20/L =(N／20)X10^9/L #### RBC计数公式： 假如N为5个中方格内红细胞总数。 计算公式： RBC=(((N/5)X25)/0.1ul) X 稀释倍数200/L RBC=(((N/5)X25)) X 10X10^6X稀释倍数200/L RBC=(N/100)X10^12/L #### PLT计数公式： 假如N为5个中方格内血小板PLT总数 计算公式: PLT=(((N/5)X25)/0.1ul) X 稀释倍数20/L PLT=(((N/5)X25)X10X10^6) X 稀释倍数20/L PLT=NX10^9/L
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### 白细胞WBC计数 #### WBC显微镜计数法: 白细胞稀释液(2%冰醋酸) 0.38ml加血20μl,充分混匀后充入计数池，然后静置2~3min,在低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞的总数，最后计算每升血液中白细胞计数值。 #### 白细胞稀释液 (2%冰醋酸配置：98ml蒸馏水加2ml浓的冰醋酸) #### 白细胞计数公式 假如N为4个大方格内白细胞总数。 计算公式： WBC=((N／4)／0.1ul) X 20（稀释倍数） =(N/4)X10^7X20/L =(N／20)X10^9/L N/4为平均每个大方格中白细胞数；0.1ul为一个大方格的体积；20 为稀释倍数：0.38ml白细胞稀释液加20μl血
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### 红细胞RBC计数 #### 红细胞计数原理 在2ml红细胞稀释液（Hayem液）中加血10ul, 混匀后，充人计数池，静置3~5分钟后，在高倍镜下，计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。 #### 红细胞计数公式 假如N为5个中方格内红细胞总数。 计算公式： RBC=(((N/5)X25)/0.1ul) X 稀释倍数200/L RBC=(((N/5)X25)) X 10X10^6X稀释倍数200/L RBC=(N/100)X10^12/L #### 红细胞稀释液 |红细胞稀释液|组成| |----|----| |Hayem液|NaCl (调节渗透压)、Na2SO4 (提高比密防止细胞粘连)、HgCl2(防腐)和蒸馏水组成。| |枸橼酸钠稀释液|由枸橼酸钠(抗凝和维持渗透压)、甲醛(防腐和固定红细胞)、氯化钠(调节渗透压)和蒸馏水组成。| |生理盐水|普通生理盐水或加1%甲醛生理盐水
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